硅罗丹明探针使生物成像具有超分辨率

刘天宇著,加利福尼亚大学圣克鲁斯

细胞内成像是用来揭示活生物体的细节。它是探索活细胞中生物分子过程不可缺少的组成部分。超分辨率显微镜(SRM)是一种新兴的细胞内成像技术,它可以获得比传统光学显微镜更高分辨率的图像。目前,SRM面临的最大挑战是开发适合于细胞内生物分子位点特异性标记的成像探针。这种探针必须具有生物相容性,膜渗透性,荧光强度高,光稳定性好。

写作化学计算机,博士。彼得·凯尔和自然科学研究中心的同事们,新利手机客户端匈牙利科学院开发了一组硅罗丹明探针,能够以新利手机客户端优异的选择性和快速反应时间(10分钟内)标记细胞内蛋白质。

合成的硅罗丹明探针由一个固定在羧基上的硅罗丹明主链组成。羧基负责探针的极性响应特性。当与极性蛋白质表面结合时,探针以荧光形式存在。当非特异性结合到疏水表面时,探针改变其结构,因此,荧光消失了。这种转化过程是基于分子内的Diels-Alder反应(下图),这种反应可以很容易地通过极性变化启动,而不会中断细胞内的自然生化过程。这种机制提供了探针的生物相容性和快速响应特性。

该探针已被证明是活体细胞的特定部位超分辨率成像。下图描述了使用哺乳动物细胞收集的实验结果。青色图像(左)显示实际的单元图像(作为参考)。利用合成的成像探针获得了中间品红色图像。叠加图像(右)显示了参考图像和标签图像的近乎完美的共同定位,表明探针具有良好的选择性。此外,在探针浓度低至1.5μm的情况下,标记过程是有效的。持续时间最短为10分钟。

这些稳定的,效率高,生物相容性探针可以大大提高各种细胞内结构的超分辨率成像。

要了解更多信息,请阅读:

细胞内超分辨显微镜用生物正交双氟硅罗丹明探针
Eszter Kozma吉罗纳·埃斯特拉达,Giulia PaciEdward A Lemke和Peter Kele
DOI:10.1039/C7CC02212C

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