薯条和小费

萨赫尔萨德吉^1­和Meltem Elitas^一

^一工程与自然科学学院新利手机客户端萨班奇大学34956，伊斯坦布尔火鸡

^*萨赫萨德吉写了这篇论文.

目的

芯片实验室（loc）设备对不同学科的科学贡献显著。新利手机客户端聚二甲基硅氧烷（PDMS）是主要材料之一。广泛用于制造生物基因座，由于其生物相容性和易用性。然而，PDMS和其他一些聚合物材料本质上是防水材料（或疏水材料）。这导致装载和操作机车困难。在生物系统中，疏水性的显著后果是微流体通道中的气泡被截留。虽然PDMS的氧等离子体处理在一定时间内降低了表面疏水性，PDMS的亲水性随着时间的推移而消失。^一.微流体中气泡的持续问题导致了为克服它而进行的几项研究。其中一些解决方案建议实施气泡捕集器。^二，三，通过亲水涂层对Locs的表面处理^四，使用主动控制的气泡去除系统^五，六.

尽管上述设计复杂性被引入LOC，以减少气泡引起的堵塞问题，这些修改也会导致更高的生产成本，复杂的操作，设备准备时间长。在许多单细胞实验中，没有丢失或损坏稀有细胞，这些细胞需要被导入LOC。在这里，我们提出了一种简单的方法，可以在不在微流体通道中引入气泡的情况下加载少量细胞。

---

材料

·____PDMS	（Dow Corning Sylgard 184硅弹性体套件）
·____移液管头	（20～200μL，埃彭多夫（3120000917）
·____Pipetman	（Gilson，P200α69889－5）
·____水乙醇70%	（扎格化学新利手机客户端）
·____细胞培养基	（DMEM）泛生物技术（P04-01548）
·____哺乳动物细胞	（MCF7，ATCC-HTB-22
·____无菌注射器	（bd 10毫升注射器，鲁尔洛克小费，（300912）
·____无菌汉密尔顿注射器	（汉弥尔顿，100 UL SIR，（84884）

---

程序

步骤1：如图所示，在PDMS装置的入口和出口处插入两个200 ul的管头。图1.

步骤2：使用移液管将70%含水乙醇引入进液管尖端。因此，微流体通道的内表面将进行消毒，并在微通道内测试流体流量，因为它在许多其他的LOC协议中应用。^七，八.

步骤3：轻轻地施加压力，按压移液管，使乙醇溶液流过PDMS装置的微通道和微腔。注意避免从出口管端施加负压，可能通过管道连接造成空气泄漏。此外，根据亨利定律，施加负压将直接影响气体在液体中的溶解量。^九这可能有助于在微通道内形成更多的气泡。正压有助于通过溶解气泡去除气泡。

步骤4：用乙醇溶液冲洗芯片后，检查芯片以确保去除气泡。如果有气泡，重复步骤2和3。

步骤5：在注射器（10毫升）中注入中等或磷酸盐缓冲盐水（PBS）。注意清除注射器内的气泡，安装并锁定注射器上的针头。然后，将介质流过针，确保针中充满介质，没有任何气泡。将针插入进液管尖端；轻轻地施加正压，用介质代替乙醇。下一步，从出口管端收集多余的介质。

步骤6：用新鲜介质填充入口管，由于入口和出口管尖中介质水平之间的一定高度（h）。微通道内将形成非常缓慢的介质流。

步骤7：将您的电池装入汉密尔顿注射器，注意确保针头和注射器内没有气泡。如步骤5所述，将汉密尔顿注射器的针头插入进液管尖端，图1.通过向注射器施加温和的正压来引入细胞。PDMS芯片中建立的流将把释放的单元传送到芯片中所需的位置。流量可调节所施加的正压力和进出口管尖收集的介质量。可以收集出口管端多余的上清液，实验过程中可通过进口管端供给新鲜介质。

---

工具书类

1. TanS.H.N.T.NguyenY.C.ChuaT.G.康.生物流体学，2010。四（3）。
2. 郑W.F.Z.王W张X.Y.江. 芯片实验室，2010。十（21）：P.2906～910。
3. 王Y.d.李，洛杉矶张H.JeonJ.E.Mendoza EliasT.A.哈瓦特S.Z.哈桑a.周D.T.爱丁顿J.Oberholzer. 生物医学微设备，2012。十四（2）：P.419-426。
4. 王Y.L.C.E.模拟人生和N.LAllbritton. 芯片实验室，2012。十二（17）：P.3036－3039。
5. 卡尔森J.M.M盖曾S.LaaksoTHaraldssonS.Malhotra KumarM梅基，H.古森斯W.范德威格纳特，. 芯片实验室，2013。十三（22）：P.4366～437
6. 戴维·科尔特斯D.F.T.X.唐D.G.S.卡佩卢托I.M.拉扎尔. 传感器和执行器B：化学，2017。二百四十三P.650-67.
7. 贝纳文特·巴贝斯，A.d.Gallego PerezD.J.HansfordS.Aranae.Perez LorenzoM.穆吉卡. 生物传感器与生物电子学，2014。六十一P.98－305。
8. YesilkoyF.R.UenoB.X.E.DesbiollesMGrisi是的。HB.J基姆，J.布鲁格. 生物流体学，2016。十（1）。
9. 亨利，W.Phil。反式R.SOC。朗德.,1803。九十三：29—274。