伊瓦尔·梅伊万特森和大卫·J。毕比
生物医学工程系，威斯康星大学麦迪逊分校美国
为什么这个有用？
聚二甲基硅氧烷（PDMS）在天然状态下是疏水的。当流体通过压力进入PDMS微流体通道时，气泡经常形成。一种促进填充的方法是将PDMS表面暴露在氧等离子体中，使其具有亲水性。然而，尽管表面具有亲水性，但仍能形成气泡，等离子体诱导的亲水性的寿命仅限于几个小时。Monahan等人[1]报告了一种填充微流体网络和阵列的替代方法。比单独进行亲水性表面处理更有效。我们提出了一种基于Monahan等人描述的程序。并对PDMS器件的细胞生物学应用提出补充意见。
我需要什么？
- 真空干燥器（例如费希尔科学猫。不。08-594-15a）。
- 真空泵（例如加斯特DOA-P704-AA，能够产生84kpa的真空）。
- 空气过滤器（例如Millipore Aervent-50一次性过滤器）。
- 打开的容器（例如用于微流体装置。选择一个容器，填充以覆盖底面时，可以倾斜以露出至少一半的底面。
真空干燥器和真空泵 |
芯片真空灌装所需设备 |
我该怎么办？
1。将真空泵连接到真空干燥器出口。如果需要进行无菌操作，将空气过滤器放在干燥器进口上，用70%乙醇（V/V）在真空干燥器内喷洒消毒，然后擦干。也，对于无菌操作，选择一个带盖子的容器，以便在生物罩和干燥剂之间进行转移。
2。准备微流体装置（例如PDMS部件与玻璃滑块粘合在一起）存放设备的容器（例如培养皿）以及您希望在设备中填充的解决方案。
三。将微流体装置放入容器中。
4。向容器中注入流体，以覆盖所有微流体设备入口。将浸入式微流体装置放入干燥器中。
5。打开真空泵，打开干燥器输出阀，关闭输入阀。真空5-10分钟。从油口流出的气泡往往粘附在油口的边缘上。
6。倾斜干燥器，使微流体装置的整个表面暴露在空气中。这将“弹出”所有的气泡。如果倾斜不足，搅拌（即出钢，敲门，等）也有助于去除气泡。
三。装入容器的芯片 |
4。将碎屑浸入液体中 |
后送后的水下切屑 |
6。倾斜干燥剂以去除气泡 |
7。打开适当的阀门，使干燥器室恢复到大气压力。目视检查通道，以确定是否已加注。如果将装置浸泡在流体中，在这一点上留下的小气泡（直径小于500微米）通常会在10分钟内消失。
8。如果气泡持续存在，延长真空应用或重复步骤3-5将改善填充。
9。这种方法适用于各种流体，包括磷酸盐缓冲盐水（PBS）Dulbecco改良的Eagle's培养基（DMEM）和蛋白质补充（例如，牛血清）尽管蛋白质倾向于改变PDMS的表面特性，使其更具亲水性。当准确的浓度至关重要时，使用这种液体进行初次填充是很重要的，例如在哺乳动物细胞培养中。
最终充液芯片
工具书类
1。J莫纳汉，a.a.格沃思，R.G.Nuzzo一种填充复合聚合物微流控器件和阵列的方法， 肛门的化学.,2001， 七十三，3193–3197年。
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